SPIRIT BLUE AGAR (SBA)

Složení

Využití

SBA je médium doporučené Americkou veřejnou zdravotnickou asociací (APHA, American Public Health Association) jako základní médium pro studium a detekci aktivity lipolytických mikroorganismů, které svou metabolickou činností produkují lipázy. Enzymatický hydrolyzát kaseinu a kvasnicový extrakt jsou v médiu zdrojem uhlíku, dusíku, vitamínů a minerálů. Jako indikátor lipolýzy je přidáváno modré barvivo Spirit Blue, které je inertní, avšak produkcí mikrobiálních lipáz vytváří jasně modrou zónu kolem rostoucích kolonií mikroorganismů. Jako zdroj lipidů se do připraveného a vysterilizovaného média (dle návodu výrobce) přidává lipoidní substrát, který se emulguje do 50 °C teplého média za energického promíchávání (protřepávání).

Lipolyticky aktivní mikroorganismy vytvářejí kolem rostoucí kolonie jasně modrou barevnou zónu, která bývá zřetelná po inkubaci při teplotě 35 – 37 °C po 48 – 72 hodinách.

Poznámka:

Lipidový substrát se připraví smícháním 400 ml teplé destilované vody s 1 ml Tween 80. Za intenzivního promíchávání se přidává 100 ml bavlníkového nebo olivového oleje jako zdroje lipidů až do dosažení rovnoměrné emulgace.